由我院黃海所環境室張旭志博士主持的“利用電化學檢測與等溫擴增技術相結合進行目標基因快速分析”研究取得重要進展,該研究由國家自然科學青年基金項目“環介導等溫基因擴增(LAMP)過程的電化學信息研究”和黃海所基本科研業務費項目“恒溫擴增自動基因檢測技術開發與應用”共同資助完成。
該研究結合LAMP和電化學伏安檢測技術,建立了一種目標基因甄別新方法。成功的LAMP反應把游離態的三磷酸2-脫氧鳥苷(dGTP,反應物之一)組裝到鏈狀產物DNA中去,結果引起該物質在碳納米管陣列電極上氧化電流的顯著下降。因此,這種伏安響應變化可以用來表征LAMP結果,進而指示出模板DNA中目標基因的信息。大腸埃希氏菌普通菌株中的malB基因作為實例得到驗證:30分鐘LAMP生化反應和約2分鐘的微分脈沖伏安檢測操作后,8.0阿克模板DNA中該基因的定性信息得到準確甄別,與傳統的凝膠電泳法及熒光染料法所得結果完美一致。
該新方法具有操作簡單、響應快、無需擴后分離處理和輔助試劑、費用低等明顯優點,易于在環境監測、臨床、檢驗檢疫、轉基因甄別等諸多領域推廣應用。此外,該方法無需電極表面的DNA探針修飾步驟,檢測儀器易實現小型化,便于攜帶,更適用于現場應用。