日前,由我院黃海水產(chǎn)研究所王偉繼副研究員等發(fā)明的“一種大菱鲆熒光標(biāo)記微衛(wèi)星六重PCR家系識(shí)別方法”獲國(guó)家發(fā)明專利授權(quán),專利號(hào)ZL200910203303.2。
該發(fā)明是利用三種熒光(6FAM, HEX和NED)對(duì)六對(duì)引物根據(jù)其PCR擴(kuò)增產(chǎn)物大小進(jìn)行了兩兩標(biāo)記;利用引物設(shè)計(jì)軟件排除這六對(duì)引物在PCR反應(yīng)過(guò)程中形成二聚體的可能,組合這六對(duì)引物于同一個(gè)PCR反應(yīng)體系中,調(diào)整PCR反應(yīng)體系,建立這六對(duì)引物可在同一個(gè)PCR反應(yīng)體系中同時(shí)擴(kuò)增的參數(shù)和合適的PCR 反應(yīng)程序;此六重PCR技術(shù)可提高大菱鲆微衛(wèi)星標(biāo)記的檢測(cè)效率,單親排除率為99.63%,個(gè)體識(shí)別力99.99%。使用該方法可以對(duì)大菱鲆不同家系進(jìn)行區(qū)分或者進(jìn)行個(gè)體間及親子之間的識(shí)別和鑒定。