日前，由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所耿龍武助理研究員等人完成的“一種淡水魚類精子掃描電鏡樣品制備方法”獲得國家發(fā)明專利授權(quán)，專利號為：ZL 201210046338.1。

該專利解決了傳統(tǒng)方法脫水、干燥、粘樣等過程中，容易因表面張力變化和外力機械損傷而引起精子開裂或龜裂 、斷裂等，使得表面結(jié)構(gòu)被破壞，導(dǎo)致觀察效果差和難于進(jìn)行微細(xì)形態(tài)學(xué)分析的問題。

與傳統(tǒng)方法相比，本方法在樣品脫水與干燥、密度控制、樣品臺載體、點樣方式等環(huán)節(jié)進(jìn)行改進(jìn)，制備過程由固定液配制、樣品固定、樣品臺準(zhǔn)備、樣品滴片、樣品鍍膜完成。本發(fā)明優(yōu)點在于：本發(fā)明的優(yōu)點在于：1）精子固定后的樣品不經(jīng)過乙醇脫水、干燥，可避免因表面張力變化而引起精子斷裂、開裂或龜裂等表面結(jié)構(gòu)破壞；2）精液固定后經(jīng)PBS磷酸鹽緩沖液沖洗2～3次，可去除精漿等其它成分，使樣品電鏡觀察時更清晰；3）精子滴片前用PBS磷酸鹽緩沖液稀釋成濃度數(shù)量級為106～107個/ml，使精子分散均勻、密度適中，利于獲得單個精子完整形態(tài)觀察結(jié)果；4）先粘貼蓋玻片、后滴片，可避免樣品受到外力機械損傷；5）滴片時采用微量加樣槍，并用針頭分散滴液，可避免樣品層太厚影響觀察效果；6）鍍膜儀噴金時間控制在90～110s，使精子樣品表面金膜厚度為9～11nm，可避免電鏡觀察時精子頭部與鞭毛光線反差過大。

本發(fā)明的技術(shù)特點是方法簡便、易操作，精子完整率高、分布密度適中，技術(shù)成本低，可應(yīng)用于淡水魚類精子掃描電鏡樣品的制備。